IM VETERINARIA #5

61 im veterinaria La selección de la especie en la inmunotera- pia canina frente a los ácaros es muy relevante tígenos presentes en un extracto de Derf comúnmente utilizado en inmunoterapia, identificando alérgenos clave en la sensibiliza- ción de los perros que sufren de dermatitis atópica. Análisis del extracto El objetivo primario del análisis ha sido determinar la presencia y proporción de los antígenos Derf15 y Derf18, los principales alérgenos causantes de la dermatitis atópica en perros. El estu- dio ha sido realizado en el suero de perros sanos o con dermatitis atópica, mayores de 12 meses, de ambos sexos y razas variadas, en el cual fue examinado el patrón de anticuerpos dirigidos fren- te a los diversos componentes del extracto de Derf analizado. La electroforesis del extracto en geles específicamente preparados para separar proteínas de bajo y alto peso molecular demostró la presencia de los principales alérgenos caninos Derf15 y Derf18, los cuales representaron el 8,2 y el 4,3% del contenido total de proteína, respectivamente. En el examen del perfil serológico de 18 perros atópicos sensibilizados a Derf y de tres animales con- trol, se constató en los atópicos la existencia de anticuerpos que reconocen las diferentes bandas del gel de separación de proteí- nas de elevado pesomolecular, sin diferencias significativas entre los animales de este grupo. En particular, el suero de todos los animales atópicos mostró contener anticuerpos que reconocen predominantemente proteínas en las bandas de 119 y 96 KDa. Estas bandas representaron el 50% de la intensidad total de to- das las bandas del gel en 9 de 18 muestras. Una banda adicional correspondiente a 57 KDa fue también hallada en la totalidad de los sueros de animales atópicos pero en ninguno de los controles. Los geles dirigidos a la detección de proteínas de bajo peso mo- lecular dejaron al descubiertomúltiples bandas en la región com- prendida entre los 13 y los 70 KDa, reconocidas principalmente por los sueros atópicos, existiendo una pequeña proporción de proteínas de entre 14 y 30 KDa reconocidas también por los sue- ros de los animales control. La banda de proteínas en la región de los 16 KDa fue la que mostrómayor grado de reconocimiento, mientras que las de 34 y 43 KDa fueron reconocidas por el 84% de todos los sueros atópicos. La identidad de Derf15 en las ban- das de 96 y 119 KDa fue confirmada mediante espectrometría de masas. En cada una de estas bandas se constató la presencia de siete péptidos diferentes derivados de este antígeno. La misma técnica confirmó la presencia de péptidos derivados de Derf18 en la banda de 57 KDa. En la tipificación de los anticuerpos, sólo los sueros de los anima- les atópicos presentaron inmunoglobulinas de la clase E (IgE) di- rigidas a los componentes del extracto de Derf. En la clase de las IgG, la única diferencia entre los sueros controles y los atópicos fue la relativa a la IgG1, cuyos niveles fueron mayores en estos úl- timos. En consonancia con la noción previa de que los antígenos Derf1 y Derf2 son poco relevantes en la atopia canina, los resul- tados de un ensayo de ELISA con estos antígenos demostraron la ausencia de diferencias significativas entre sueros atópicos y controles. Impacto clínico Las diferencias en las manifestaciones clínicas de la alergia al HDM en humanos y perros hace necesario establecer para estos últimos una inmunoterapia específica ajustada a sus característi- cas inmunológicas. Para el diseñode una inmunoterapia eficaz es, por tanto, imperativo tener en cuenta la composición alergénica en función del perfil de sensibilización, la especie que origina el alérgeno, su concentración y su estandarización biológica, entre otros factores. La población canina de este estudio proviene de un entorno geográfico en el que las dos principales especies de HDM se encuentran en similar abundancia (100-500 HDM/g). Sin embargo, y en consonancia con estudios previos, el suero de todos los animales sensibilizados presentó reactividad frente a Derf15. La secuenciación de las bandas de 43 y 34 KDa reveló la presencia de más de un alérgeno en cada una de ellas, lo que podría ser explicado por los diferentes grados de glucosilación en los que pueden encontrarse dichos alérgenos y quemodifican su migración en condiciones reductoras. Los animales atópicos de este estudio también presentaron anticuerpos dirigidos contra los alérgenos de bajo peso molecular Derf1 y Derf2, lo que ad- judica a estos alérgenos mayor relevancia de la que se creía. Por tanto, la población canina estudiada presenta reactividad a un amplio espectro de proteínas de Derf, incluyendo Derf15, Derf18, Derf1 y Def2, así como otras proteínas no identificadas de 30 y 45 KDa. Los resultados ponen de manifiesto que el sistema inmuni- tario de humanos y perros procesa esas proteínas de manera di- ferente, con consecuencias inmunológicas igualmente diversas. También indican que la eficacia de la inmunoterapia en perros es contingente a la presencia y buena proporción en la vacuna de los alérgenos citados. Aunque algunos estudios han sugerido que el solapamiento an- tigénico entre Derp y Derf es lo suficientemente extenso como para utilizar el extracto de una única especie para inmunizar fren- te a las dos, es necesario considerar que cada especie presenta una ecología y requerimientos vitales específicos. Mientras que Derf se alimenta principalmente de bacterias, Derp ingiere pro- ductos de descamación humanos, lo que podría justificar el ma- yor potencial alergénico de Derf en los perros. Consecuentemen- te, la selección de la especie en la inmunoterapia canina es muy relevante, incluso cuando la distribución geográfica de ambas especies de ácaros es muy similar, como es el caso en España. Referencia bibliográfica: Immunoproteomic characterization of a Dermatophagoides farinae extract used in the treatment of canine atopic dermatitis Autores: Moya R., Carnés J., Sinovas N., Ramió L., Brazis P., Puigdemont A.